Aplicación del sistema CRISPR/CAS9 para la obtención de una línea celular de la Enfermedad de Batten

Abstract

[ES] Las lipofuscinosis ceroideas neuronales (NCL) son un grupo de trastornos metabólicos neurodegenerativos. Hasta el momento se han descrito 14 variantes diferentes de NCL con características patológicas similares aunque causadas por mutaciones en diferentes genes. De entre todas, la variante juvenil (JNCL, CLN3 o enfermedad de Batten) es junto a la forma infantil tardía, la más prevalente. En la enfermedad de Batten, la mutación más frecuente en el gen CLN3 es una deleción de 1,02 kb, que afecta a los exones 7 y 8 y que determina que la traducción se detenga de forma prematura. Actualmente, el laboratorio dispone para el estudio de la enfermedad de Batten de diversas muestras de pacientes con la deleción anterior. Aunque se dispone de dos líneas de linfoblastos, solo se dispone de una de fibroblastos. Para aumentar el número de modelos celulares disponibles para el estudio de la enfermedad, en este trabajo, se modificaron genéticamente células HEK293T y SH-SY5Y utilizando la tecnología CRISPR/Cas9, para producir la deleción de 1,02 kb en el gen CLN3.

[EN] Neuronal ceroid lipofuscinosis (NCL) are a group of neurodegenerative metabolic disorders. Until now, have been described 14 different variants of NCL with similar pathological features caused by mutations in different genes. Among all, the juvenile variant (JNCL, CLN3 or Batten disease) together with late infantile variant, is the most prevalent form. In Batten disease, the most common mutation in the CLN3 gene is a 1.02 kb deletion that affects exons 7 and 8 and stops translation prematurely. Currently, the laboratory has samples from patients with the previous deletion for the study of Batten disease. Although there are two lines of lymphoblasts, it only has a line of fibroblasts. To increase the number of cell models available for the study of disease, in this work, HEK293T and SH-SY5Y was genetically modified using CRISPR/Cas9 technology to produce the 1.02 kb deletion in CLN3 gene.